关键词:生药学; 胶原蛋白;创伤愈合;羟脯氨酸
中图分类号: S865.42 文献标识码: A DOI编号: 10.14025/ki.jlny.2017.13.017
具有广泛的药理,但是深加工研究滞后,对其提取物有效活性成分的研究甚少。胶原蛋白由于结构独特,理化性质及生物特性非常突出,在医疗上的应用具体表现在胶原蛋白具有低免疫源性、组织之间的协调作用强、物理机械性能好,可生物降解度高,具体体现在止血、治疗烧伤和骨折等方面手术的应用。
。通过本研究为后续开发鹿茸胶原蛋白相应的药品(如喷剂)奠定理论基础,以达到科学利用现有的鹿茸资源,增加鹿茸产品附加值的目的,从而促进我国鹿业养殖实现可持续性发展。
1 材料与方法
1.1主要仪器设备
紫外可见分光光度计、高速离心机、真空冷冻干燥机。
1. 2实验材料
新鲜鹿茸,清洁级胰蛋白酶,清洁级小白鼠50只,羟脯氨酸标准品等。
1.3方法
1.3.1提取 在4℃条件下,利用盐酸使梅花鹿茸灰分中的不溶物变成可溶性盐类,选择氯化钠溶液作为除杂蛋白的主要试剂,达到将其脱除的目的[1]。采用徐云凤的胰蛋白酶水解制备鹿茸胶原蛋白的方法,取新鲜的鹿茸50克,加入150毫升乳酸盐的缓冲液,用组织绞碎机绞碎,加入胰蛋白酶0.5克,加入激活┞然锰0.05克,pH值调为8.0,将溶液的温度调至52℃,放入反应罐3小时,离心去残渣,收集透明澄清的液体,在10℃条件下进行酶解提取[2]。
1.3.2纯化 在中性条件下盐析全部胶原蛋白,方法如下:向梅花鹿茸胶原蛋白酶解液中缓慢加入,并搅拌经过研磨的氯化钠,充分搅拌,静止10~24小时,以便胶原蛋白充分析出,再以8000转的速度离心,收集沉淀物后用0.5mol/L乙酸进行溶解,并对0.5mol/L乙酸进行透析,以便除去沉淀中的多余盐分,最后将样品进行真空冻干[3]。
1.3.3动物造模分组及给药 购买清洁级小白鼠50只,分别用乙醚进行浅麻醉。局部备皮,常规消毒,将小鼠皮部取直径为1厘米的圆形切口,切开皮肤全层, 至深筋膜, 制作出直径相同的圆形创面, 然后以无菌纱布覆盖, 造模完成。把小鼠随机分成五组,根据人和小鼠的体重与表面积比计算得出小鼠给药量=小鼠体表面积×小鼠体重/人的体表面积×人的体重×人体用量。设高、中、低3个实验组,1个空白对照组,1个阳性对照组,将实验组创面分别使用0.05mol/L,0.25mol/L,
0.5mol/L的梅花鹿茸胶原蛋白,每日两次,空白组不进行药物治疗,阳性对照组用京万红以相同药量做阳性对照。以无菌纱布覆盖,防止感染,连续给药观察。
1.3.4羟脯氨酸含量检测 胶原蛋白是构成结缔组织中胶原纤维的主要成分,含羟脯氨酸的量最多,是愈合组织中最重要的成分,在一定时间内,创伤愈合部位组织中的胶原蛋白的含量会反映伤口的愈合程度[4]。羟脯氨酸是胶原蛋白中的特征性氨基酸,因此测定动物组织中羟脯氨酸的含量即可定量观察创伤组织的愈合程度。取创面皮肤经脱水及脱脂处理后水解,根据羟脯氨酸的测定原理,使用氯化亚锡对梅花鹿茸胶原蛋白样品进行水解使其释放羟脯氨酸,加入氯氨T、二甲氨基苯甲醛,于558纳米波长处比色,比较羟脯氨酸含量。若实验组羟脯氨酸含量高于空白对照组,则说明创面胶原蛋白水平提高,即创面伤口愈合情况较好[5]。
1.3.5创面愈合情况评价 描记创面愈合面积,以创面完全上皮化(病理证实)作为判断依据,记录创面愈合时间。。再以实验组和对照组的创面愈合率进行对比,来确定鹿茸胶原蛋白是否起到愈合伤口的作用[7]。
2 实验结果
2.1 组织学观察
5个分组创伤涂药后均有不同程度的创面肿胀、渗出现象。伤口用药组涂药后创面出现肿胀、渗出程度较对照组轻。5个分组创伤2天后创面均有不同程度的干燥、结痂现象,其痂皮呈淡黄色,质地较软,无异常分泌物出现及感染情况出现。
2.2 小鼠创面愈合率(见表1)
2.3羟脯氨酸标准样品浓度与吸光度的测定结果(见表2)
2.4以羟脯氨酸浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线(见图1)
计算其回归方程为:y=0.076x+0.0035,r=0.9995(P
2.5小鼠组织中羟脯氨酸含量的测定(见表3)
由表3可知,小鼠创伤处组织中羟脯氨酸的含量逐渐递增,由于羟脯氨酸浓度和胶原蛋白浓度成正相关,羟脯氨酸浓度的变化即可反映小鼠组织中胶原蛋白的变化,由此可知,鹿茸胶原蛋白对伤口愈合的对比情况。
3 讨论与分析
经实验初步证明,鹿茸胶原蛋白对伤口创伤愈合有促进作用,不同浓度胶原蛋白对伤口的愈合率不同,高浓度的愈合率大于不用药的伤口愈合率,且伤口的愈合程度与鹿茸胶原蛋白的浓度有关。
参考文献
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[3]王燕,付万冬,郑斌.酶法提取鱿鱼皮胶原蛋白[J].食品科技,2011,(06).
[4]付小兵,孙同柱.几种用于创作修复研究的动物模型.中华实验外科杂志,1999,16(05): 479-480.
[5]陈玉华,廖仕成,李瑞园,等.乳及乳制品中羟脯氨酸测定方法的研究[J].职业与健康,2010,2(03):283-285.
[6]彭方毅,周欢,姜海蓉,袁兵占,崔玉花.一种新型优化的肺组织羟脯氨酸水平测定方法的建立[J].重庆医学,2014,(11).
[7]杨晶,孙凤,丁武.波尔山羊杂交代肌肉中羟脯氨酸含量的测定及其与肌肉品质的关系[J].农产品加工(学刊),2012,(01).
关键词:电容器 电路功能 作用
接前文
(二)脉冲波发生器
在电子技术中经常要处理许多非正弦波形,如方波,三角波等。通常将这一类非正弦波形称为脉冲。用于处理脉冲波的电路称为脉冲电路。
1、图十所示的电路称为方波发生器,产生振荡时,其周期为: 。改变 , , 的比值可改变周期。
2、图十一所示的电路称为矩形波发生器,产生振荡时,其周期为: ,波形高电平的时间与周期的比,称为占空比。调节 可改变矩形波的占空比。
3、图十二所示的电路称为三角波发生器,产生振荡时,其周期为: ,改变 的比值和R4,C的数值即可改变周期。
4、图十三所示的电路称为锯齿波发生器,产生振荡时,其周期为: ,改变 的比值可改变周期。
五、脉冲变换电路
在电路中,由于电容器的贮能和泄能需要一定的时间,即有一个暂态过程。因此,如果给电路输入一个阶跃电压,在R或C上所得到的输出波形是与输入波形不一样的。在很多场合,我们就是利用了电容的这一物理特性,组成了各种各样的电路,将某种脉冲的波形按照我们的需要进行波形变换。
1、RC微分电路
在如图十四所示的电路,与我们熟知的放大器中的RC耦合电路完全相同,但是,如果我们将元件的数值取得巧妙一些,它就不是RC耦合电路而是RC微分电路了。给电路输入脉冲宽度为tu的矩形脉冲Vs,则输出波形Vo为一对正负尖脉冲。如图十五所示。 当满足关系RC
2、CR积分电路
有时,需要把矩形波变换成三角波,这时你便用得上积分电路了。在图十六所示的电路中输入矩形波,在输出端上便会得到三角波了,如图十七所示。电容两端的电压Vo与其充电电流i有如下关系: ,在一个脉冲周期内,当满足条件: t>>τ时,即 ,则有 ,故称此电路为积微分电路。
3、CR分压器
大家知道,利用两个电阻串联,可以做成一个简单的分压器。然而,由于分布电容Cm的存在,如图十八所示,这个电路用于脉冲电路中,输出电压波形却要发生变化。如果给R1接上一个电容C1,只要适当调整C1C2的值,使之满足 , ,输出电压的波形就再也不会发生变化了。如图十九所示。
电容器在信号电路中主要完成隔直、耦合、旁路(去耦)、中和、振荡、同步及时间常数的作用,但具体用法却是千变万化的,实在太多,无论我们怎么学都是学不完的,愿我们在今后的工作、学习中不断努力,逐步加深对电容器这个功臣的认识。让它更好的为我们的现代化技术服务。
参考文献:
[1]半导体线路,复旦大学物理系编,上海人民出版社,1973年8月第1版,1973年8月第1次印刷。
[2]晶体管电路,清华大学电子工程系、工业自动化系编,科学出版社,1974年7月第1版,1974年7月第1次印刷。
关键词:农村金融效率;农村经济发展;AK模型;VAR模型;农村储蓄—投资转化率;农村金融相关比率;农村储蓄率
中图分类号:F30;F832.1 文献标志码:A 文章编号:1674-8131(2013)01-0035-10
一、引言
20世纪80年代中期,以罗默(1986)、卢卡斯(1988)为代表的一批经济学家提出了内生增长理论,认为一个国家在经历了主要依靠有形要素(资本和劳动力)的投入、结构的优化配置以及制度上的创新等手段实现经济发展之后,都面临着如何继续保持经济稳定增长的问题(邓莉 等,2005)。要实现经济的持续稳定增长,必须实现增长方式的转变,即实现从依靠要素数量扩充的外延式增长转变为依靠全要素生产率提高的内涵式增长。 在这种转变过程中,需要有金融中介来动员居民储蓄,聚集金融资源,从而促进经济增长(董晓林 等,2004;张颖慧,2007)。
中医认为,鹿茸甘、咸而温,入肾、肝经,可补肾益髓,壮阳健骨,治疗肾阳不足,精髓亏损所致的男子虚劳精衰、精血两虚、腰膝酸痛、畏寒乏力、筋弱神疲、滑精阳萎、眩晕耳鸣、遗尿尿频、小儿发育不良及妇女崩漏带下等。《大明本草》言其“补男子腰肾虚冷,脚膝无力,精溢自出,女子崩中漏下,赤白带下。炙末空心酒服,壮筋骨”。《本草纲目》言其“生精补髓,养血益阳,强筋壮骨,治一切虚损、耳聋、目暗、眩晕、虚痢”。《本经逢原》言其“扶阳固阴,非它草木可比”。
现代医学研究认为:鹿茸含卵磷脂、性激素、各种维生素、白蛋白、氨基酸及矿物质等成份,可促进生长发育,增强心脏功能。临床应用鹿茸能增强机体活力、消除疲劳、改善食欲和睡眠,可使伴有低血压的慢性循环障碍者脉搏充盈,血压升高,对已疲劳的心脏作用更为明显。中等剂量的鹿茸提取物有增强心脏收缩力,加快心率。改善心功能作用,对小儿发育迟缓或神经衰弱,病后体虚等,有促进发育,调整植物神经功能的效果。鹿茸尚能提高妇女子宫的张力和增强其节律性收缩,促进创伤、骨折和溃疡的愈合,还能促进血红蛋白、网织红细胞增生。
一般男子宜服补阳作用较强的黄毛鹿茸,女子宜服补阴作用较强的青毛鹿茸,每取1—3克,研末分2~3次吞服,或随方配用。
鹿角为雄鹿已骨化的角,味咸,性温,入肝、肾经,可补肾助阳,强筋健骨,可作为鹿茸代用品,但药力较弱,长于活血散瘀消肿,可治疮疡肿毒,瘀血疼痛,内服、外用均可,每取5—10克,煎服或研末服。
鹿胶为鹿角煎熬浓缩而成的胶状物,功效介于二者之间,味甘而咸,性温,入肝、肾经,可补肝肾、益精血,兼可止血,适用于肾阳不足,精血亏虚,虚寒血证,以及阴疽内陷者,每取5—10克,烊化饮服。
鹿角霜为鹿角熬膏后所存残渣,味甘,性微温,功用同鹿角,但药力较逊,偏于收敛,常用于崩漏、带下及疮疡溃后久不收敛者,每取10—15克,煎服。外用适量。现介绍几则鹿茸服食方法,供选用。
研粉法:将鹿茸研为细粉状。每次1—3克,用纱布或滤纸包好,放入沸水中冲泡后代茶饮服。
蒸蛋法:将鹿茸研为细粉状,每次用鸡蛋2个拌入本品1克,或将鸡蛋顶端钻一小孔,纳入鹿茸粉拌匀,蒸或炒熟后服食。
煮粥法:取大米适量煮为稀粥,待熟后调入鹿茸粉1~3克,再煮一、二沸即成,每日1次服食。
泡酒法:取鹿茸10克,加入米酒或烧酒500毫升浸泡7日后饮服,每日2次,每次空腹饮20—50毫升,酒尽再续,至味尽后止。
【摘要】 目的:比较鹿茸、鹿托盘、鹿骨水溶性总蛋白差异。方法:采用SDS聚丙烯酰铵凝胶电泳和BCATM蛋白含量测定法比较鹿茸、鹿托盘、鹿骨水溶性总蛋白差异。结果:鹿茸水溶性总蛋白、鹿托盘水溶性总蛋白和鹿骨水溶性总蛋白的相对含量及组成差异极其明显,SDS聚丙烯酰铵凝胶电泳法及BCATM蛋白含量测定法是鉴别鹿茸、鹿托盘及鹿骨有效方法。结论:本研究对鉴别鹿茸、鹿托盘、鹿骨粉具有一定的意义。
【关键词】 鹿茸;鹿托盘;鹿骨;水溶性总蛋白质
1 材料仪器
1.1 材料 梅花鹿茸、鹿托盘和鹿骨均由吉林东丰药业提供。低分子量标准蛋白质,购于中国科学院上海生物化学研究所;BCATM(二辛可宁酸或二羧基喹啉)蛋白浓度试剂盒,购于美国Pierce公司;其他试剂均为分析纯。
1.2 仪器 Heto LL3000型冻干机,瑞典Jouna Nordic公司;电泳仪,北京六一仪器厂;垂直板电泳槽,北京六一仪器厂;高速离心机,Eppendorf公司。
2 实验方法
2.1 总蛋白的提取 取等量干品鹿茸、鹿托盘和鹿骨用车床机粉粹成细粉(120目)即可。分别取鹿茸粉,鹿托盘粉,鹿骨粉100 g,用20mM TrisHCl pH8.0(含0.1 mol NaCl、1 mmol EDTA、1 mmol PMSF)缓冲液浸提(4℃×24 h),离心(10020 rpm×5 min),即得上清;沉淀用上述缓冲液反复浸提3次,离心(100 20 rpm×5 min),合并上清,用80%硫酸铵沉淀,静置(4℃×24 h),离心(100 20 rpm×5 min),将沉淀用蒸馏水透析,冻干即得鹿茸水溶性总蛋白,鹿托盘水溶性总蛋白和鹿骨水溶性总蛋白粗品。
2.2 蛋白含量测定 使用PIERCE公司生产的BCATM蛋白试剂盒测定浓度。
2.3 SDS聚丙烯酰铵凝胶电泳 按文献方法[2],采用溶度为10%的分离胶和溶度为5%的溶缩胶,溶缩胶电压为70 mV,分离胶电压为140 mV。采用考马斯亮蓝R250进行染色,最后用脱色液(甲醇∶冰醋酸∶蒸馏水=4.5∶4.5∶1)脱色,至背景清楚,观测分子量范围。
3 结果
3.1 梅花鹿鹿茸、鹿托盘及鹿骨水溶性总蛋白含量测定 各取100 g梅花鹿鹿茸粉、鹿托盘粉及鹿骨粉得到水溶性蛋白粗品分别为17.1g、8.0 g、 0.1 g,使用PIERCE公司生产的BCATM蛋白试剂盒测定浓度,粗品蛋白中蛋白含量分别为93%、88%、73%。
3.2 SDSPAGE电泳 可见鹿茸水溶性总蛋白明显可见有带,其分子量大约分别为110KD、100KD、66KD、51KD、43KD、35KD、30KD、14KD。从带上看,含量最高的是分子量为66KD的蛋白;其次分子量为14KD的蛋白。
鹿托盘水溶性总蛋白明显可见有11条带,其分子量大约分别为110KD、100KD、66KD、51KD、43 KD、30KD、23KD、17KD、16KD、14KD,10KD。从带上看,含量最高的是分子量为66KD的蛋白;其次分子量为51KD的蛋白。
鹿骨水溶性总蛋白几乎无明显可见的蛋白带(见表1)。
4 讨论
目前,对鹿茸、鹿托盘、鹿骨临床疗效物质作用基础研究较少,特别是对于鹿茸、鹿托盘、鹿骨中大分子进行评价,为临床应用提供表1 鹿茸、鹿托盘和鹿骨的蛋白谱带分布相对分子量10KD14K16KD17KD23KD30KD35KD43KD51KD66KD100KD110KD鹿 茸MWWWWSWW鹿托盘WWWWWWWMSWW鹿 骨[11]W
注:S:strong;M:medium;W:weak。。蛋白质是生命的物质基础,每一种蛋白质都有特定的生物学功能[3]。经SDS聚丙烯酰铵凝胶电泳比较鹿茸、鹿托盘、鹿骨蛋白差异发现:鹿骨里几乎无明显可见的蛋白谱带,鹿托盘具有与鹿茸相同的7条蛋白带,其分子量分别约为110KD,100KD,66KD,51KD,43KD,30KD,14KD。同时鹿托盘存在4条特异性蛋白带,其分子量分别为10KD,16KD,17KD,23KD;鹿茸本身也具有它独有的蛋白,其分子量为35KD。研究结果显示鹿茸、鹿托盘和鹿骨的蛋白成分差异大。由于鹿茸、鹿托盘和鹿骨的应用差别很大,因此这种差别可能就是由于它们所含蛋白差别所致。因此我们的这一工作,为以后进一步深入研究鹿茸、鹿托盘、鹿骨的作用机理及新药开发研究奠定很好的基础。
目前在市场上,鹿茸粉、鹿托盘粉、鹿骨粉几乎很难区别开来,大量存在以劣充好,相互掺杂的现象,很难用性状鉴别、薄层鉴别、理化鉴别、粉末显微鉴别[4]等方法鉴别。由研究结果可见,SDS聚丙烯酰铵凝胶电泳是鉴别鹿茸粉,鹿托盘粉,鹿骨粉的快速,有效方法,更为以后的指纹图谱鉴定提供一个很好的依据。
参考文献
[1]黄兆胜.中药学[M].北京:人民卫生出版社,2002:6.
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[3]王继峰.生物化学[M].北京:中国中医药出版社,2002:2951.
摘 要:以鹿茸菇为试材,以工厂化生产常用原材料为基础,设计五种配方,研究鹿茸菇在其中的菌丝生长情况和栽培单产,筛选出适合鹿茸菇工厂化生产的栽培配方。结果表明:配方3即木屑30%、玉米芯24%、棉籽壳5.5%、麸皮27%、米糠3%、大豆皮5%、增产剂5%、碳酸钙0.5%的配方为最适宜的工厂化生产配方。
关键词:鹿茸菇;工厂化生产;配方
鹿茸菇(Lyophyllum decastes),在分类学上属于植物界(Plant kingdom),真菌门 (Eumycota),层菌纲(Hymenomycetes),伞菌目 (Agaricales),白蘑科(Tricholomataceae),离褶伞属(Lyophyllum)。它是一种味道鲜美的食用菌,学名珊瑚菌,子实体直立,向上分叉成丛生的细枝,肉质,一般高数厘米至10余厘米,状如扫帚或珊瑚,又像幼小的鹿角,故名。研究表明鹿茸菇子实体中粗蛋白、氨基酸的含量较高,脂肪含量较低;而且还含有对人体有益的微量元素锌、铜和硒及大量的维生素和烟酸,具有很高的营养价值。据现代科学研究表明,鹿茸菇含有的β葡萄糖,L期食用有抗肿瘤的功效,同时,鹿茸菇具有降血压、降低胆固醇、抗糖尿病、抗过敏等药用作用,能滋补强壮,扶正固本,增强免疫,延缓衰老的功效。目前对鹿茸菇的栽培研究较少,大多只集中在生物学特性上。
1 材料与方法
1.1供试菌株
鹿茸菇菌株092,由上海光明森源生物科技有限公司研发部菌种保藏中心提供。
1.2培养基
试管种用PDA培养基(PDA粉/3.9g,琼脂/0.1g,蒸馏水/100mL),摇瓶种(K2HPO4・3H2O/0.3g,KH2PO4/0.15g,MgSO4/0.15g,糖/6g,蛋白胨/1.5g,玉米粉/0.6g,豆粕粉/0.6g,蒸馏水/300mL),21℃培养箱培养,7天后待用。
1.3不同培养料配方对鹿茸菇生长的影响
1.3.1试验方法与设计
根据鹿茸菇对不同原材料的利用特性,改变配方中不同原材料的配比,调节主料和辅料的组合,每个配方装瓶3筐,共48瓶,试验重复4次。具体配方详见表1。
鹿茸菇(Lyophyllum decastes),在分类学上属于植物界(Plant kingdom),真菌门 (Eumycota),层菌纲(Hymenomycetes),伞菌目 (Agaricales),白蘑科(Tricholomataceae),离褶伞属(Lyophyllum)。它是一种味道鲜美的食用菌,学名珊瑚菌,子实体直立,向上分叉成丛生的细枝,肉质,一般高数厘米至10余厘米,状如扫帚或珊瑚,又像幼小的鹿角,故名。研究表明鹿茸菇子实体中粗蛋白、氨基酸的含量较高,脂肪含量较低;而且还含有对人体有益的微量元素锌、铜和硒及大量的维生素和烟酸,具有很高的营养价值。据现代科学研究表明,鹿茸菇含有的β葡萄糖,长期食用有抗肿瘤的功效,同时,鹿茸菇具有降血压、降低胆固醇、抗糖尿病、抗过敏等药用作用,能滋补强壮,扶正固本,增强免疫,延缓衰老的功效。目前对鹿茸菇的栽培研究较少,大多只集中在生物学特性上。
1 材料与方法
1.1供试菌株
鹿茸菇菌株092,由上海光明森源生物科技有限公司研发部菌种保藏中心提供。
1.2培养基
试管种用PDA培养基(PDA粉/3.9g,琼脂/0.1g,蒸馏水/100mL),摇瓶种(K2HPO4・3H2O/0.3g,KH2PO4/0.15g,MgSO4/0.15g,糖/6g,蛋白胨/1.5g,玉米粉/0.6g,豆粕粉/0.6g,蒸馏水/300mL),21℃培养箱培养,7天后待用。
1.3不同培养料配方对鹿茸菇生长的影响
1.3.1试验方法与设计
根据鹿茸菇对不同原材料的利用特性,改变配方中不同原材料的配比,调节主料和辅料的组合,每个配方装瓶3筐,共48瓶,试验重复4次。具体配方详见表1。
2.2不同培养料配方对鹿茸菇子实体产量、品质及生物学转化率的影响
由表3可知,5组配方对子实体的产量、品质和生物学转化率有一定的影响。其中,不同配方的子实体平均单产依次是3〉4〉5〉2〉1,配方3的单产最高为315.7g;生物学转化率也是最高为116.1%;且配方3品质相对较好,紧实度、整齐度均良好,菇帽颜色也偏深、圆整,菇柄偏长等在5个配方中,也具有明显的优势。通过对不同培养料栽培鹿茸菇的产量进行方差分析,F=260.06〉F(0.01)5.99,说明鹿茸菇单产与不同配方的培养料呈极显著差异。
3. 结论
试验结果表明,以木屑、玉米芯、棉籽壳、麸皮、米糠和大豆皮为原料,通过调节不同原料的配比,对鹿茸菇的菌丝生长、产量、品质都有一定的影响。鹿茸菇菌丝生长较好的配方是木屑含量相对较高的为配方3。这是因为一方面菌丝利用木质素较容易,另一方面,木屑含量高增加了培养基内的孔隙度,利于菌丝快速长满瓶。通过5组试验配方比较,配方3的鹿茸菇子实体单产最高,且生物学转化率也最高,是适合工厂化生产使用的配方。同时,该配方也缩短了整个栽培周期,提高了企业库房的利用率。
参考文献
[1]尚启. “闻香松口蘑 食味鹿茸菇”――上海福茂公司三万公斤鹿茸菇投放市场[J]. 上海企业,2014,01:82.
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[4]曹栩滢,孙占刚. 上海食用菌产业现状及发展对策[J]. 食用菌,2015,05:8-10
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